DdNTP'leri kullanmanın amacı nedir?
DdNTP'leri kullanmanın amacı nedir?

Video: DdNTP'leri kullanmanın amacı nedir?

Video: DdNTP'leri kullanmanın amacı nedir?
Video: Dideral Tablet Nedir? Dideral Tabletin Yan Etkileri Nelerdir? Dideral Tablet Nasıl Kullanılır? 2024, Kasım
Anonim

DdNTP atıfta bulunur dideoksinükleotidler Sanger dideoksi yönteminde DNA dizilemesi için farklı uzunluklarda DNA dizileri üretmek için kullanılan trifosfatlar. Bu, DNA polimerizasyonunun (veya DNA uzamasının) sona ermesiyle sonuçlanır, çünkü bu işlemin devam etmesi için bir 3'-OH grubuna ihtiyaç vardır.

Bu nedenle, sıralamada neden ddNTP'ler kullanılır?

dideoksinükleotidler DNA polimerazın zincir uzatan inhibitörleridir, kullanılmış DNA için Sanger yönteminde sıralama . Dideoksiribonükleotitler bir 3' hidroksil grubuna sahip değildir, dolayısıyla bu dideoksinükleotit zincir üzerinde olduğunda başka zincir uzaması meydana gelmez. Bu, DNA'nın sona ermesine yol açabilir sıra.

Benzer şekilde, ddNTP'ler dNTP'lere bağlanır mı? Bir veya daha fazla dNTP'ler replikasyon ürünlerini görselleştirmeye yardımcı olmak için radyoaktif olarak etiketlenir. Son olarak, her tüp adı verilen dört özel nükleotitten birini alır. dideoksinükleotidler ( ddNTP'ler ). Bununla birlikte, bir kez dahil edildiğinde, DNA polimeraz zinciri daha fazla uzatamaz çünkü bir 3'-OH'ye ihtiyaç duyar. eklemek sonraki nükleotide.

Benzer şekilde, ddNTP'ler bir dizileme reaksiyonunu nasıl durdurur?

içinde küçük miktarlarda bulunduğunda sıralama reaksiyonları , dideoksiribonükleosit trifosfatlar ( ddNTP'ler ) sonlandırmak sıralama reaksiyonu büyüyen DNA dizilerinde farklı pozisyonlarda. ddNTP'ler bir sıralama reaksiyonunu durdurur çünkü onlar: DNA polimerazın şablon iplikten düşmesine neden olurlar. C.

Dideoksinükleotidleri içeren hangi teknik kullanılabilir?

Sanger dizilimi bir yöntem zincir sonlandırmanın seçici olarak dahil edilmesine dayanan DNA dizilimi dideoksinükleotidler in vitro DNA replikasyonu sırasında DNA polimeraz tarafından. 1977'de Frederick Sanger ve meslektaşları tarafından geliştirilen, en yaygın olanıydı. kullanılmış sıralama yöntem yaklaşık 40 yıldır.

Önerilen: