Gibson klonlama nasıl çalışır?
Gibson klonlama nasıl çalışır?

Video: Gibson klonlama nasıl çalışır?

Video: Gibson klonlama nasıl çalışır?
Video: HDD'yi SSD'ye klonlamak-Disk İmajı Nasıl Alınır? 2024, Kasım
Anonim

NS Gibson Klonlama Master Mix, tek bir tampon içinde üç farklı enzimden oluşur. Her enzimin reaksiyon için özel ve benzersiz bir işlevi vardır: T5 Ekzonükleaz - DNA 5' ucundan geri çiğneyerek tek iplikli DNA 3' sarkıntıları oluşturur. Tamamlayıcı DNA parçaları daha sonra birbirlerine tavlanabilir.

Bunu göz önünde bulundurarak, Gibson nasıl çalışır?

NS Gibson Assembly® yöntemi, restriksiyon enzimi sindirimine veya uyumlu restriksiyon bölgelerine ihtiyaç duymadan iki veya daha fazla fragmanın klonlanmasına izin veren bir klonlama prosedürüdür. Bunun yerine, kullanıcı tanımlı örtüşen uçlar, bitişik parçaların kesintisiz birleştirilmesine izin vermek için parçalara dahil edilir.

Benzer şekilde, Gibson Assembly Master Mix'te neler var? NS Gibson Klonlama Master Karışımı tek bir tampon içinde üç farklı enzimden oluşur. Her enzimin reaksiyon için özel ve benzersiz bir işlevi vardır: T5 Ekzonükleaz - DNA 5' ucundan geri çiğneyerek tek iplikli DNA 3' sarkıntıları oluşturur. Tamamlayıcı DNA fragmanları daha sonra birbirlerine tavlanabilir.

Bu şekilde Golden Gate montajı nasıl çalışır?

altın Kapı klonlama veya Golden Gate meclisi bir araştırmacının Tip II kısıtlama enzimleri ve T4 DNA ligaz kullanarak birden fazla DNA fragmanını tek bir parça halinde aynı anda ve yönlü olarak birleştirmesine izin veren bir moleküler klonlama yöntemi. Bu montaj in vitro olarak gerçekleştirildi.

Ağ Geçidi klonlama nasıl çalışır?

NS AĞ GEÇİDİ Klonlama Teknoloji, faj l tarafından DNA'sını E'ye entegre etmek için kullanılan bölgeye özgü rekombinasyon sistemine dayanmaktadır. Eklenen faj DNA'sını çevreleyen attL ve attR bölgeleri, faj l'deki attP bölgesini yeniden oluşturmak için eksizyon olayı sırasında bölgeye özel olarak yeniden birleşir ve attB sitesi E.

Önerilen: