Çok fazla kısıtlama enzimi eklerseniz ne olur?
Çok fazla kısıtlama enzimi eklerseniz ne olur?

Video: Çok fazla kısıtlama enzimi eklerseniz ne olur?

Video: Çok fazla kısıtlama enzimi eklerseniz ne olur?
Video: Terbiyesiz ve Saygısız Tavırları Karşısında Daha Fazla Sessiz Kalamazdık 2024, Kasım
Anonim

Eksik sindirim oluşabilir ne zaman çok fazla veya fazla biraz enzim kullanıldı. NS kirleticilerin varlığı NS DNA örneği Yapabilmek engellemek enzimler , ayrıca eksik sindirim ile sonuçlanır. Biraz Kısıtlama enzimleri tam aktivite için kofaktörler gerektirir.

Ayrıca kısıtlama enzimleri neden en son eklenir?

NS Kısıtlama enzimi genellikle geçen bileşen katma aşırı koşullara maruz kalmamasını sağlamak için bir reaksiyona. Toplanan reaksiyon sonra karıştırılmalıdır enzim ek. içeren tüm çözeltileri karıştırın. Kısıtlama enzimleri önlemek için nazikçe enzim inaktivasyon.

Ayrıca, kısıtlama enzimi sindirimi nasıl geliştirilebilir? Önerilenden fazlasını kullanmayın enzim miktar (örneğin, 10 birim enzim mikrogram DNA başına). miktarını azaltın enzim gerekirse reaksiyonda. Uzun süreli inkübasyondan kaçının sindirim reaksiyon. Önerilen reaksiyon tamponunu kullanın.

Ayrıca bilin, bir kısıtlama enzimi neden kesmez?

Parçalanacak DNA'nın Hazırlanması NS fenol, kloroform, alkol, EDTA, deterjanlar veya aşırı tuzlar gibi kirletici maddeler içermemeli ve bunların tümü Kısıtlama enzimi aktivite. Bir inhibitör (genellikle tuz, EDTA veya fenol) mevcutsa, kontrol DNA'sı Kesilmemiş karıştırdıktan sonra.

Enzim miktarı neden yıldız aktivitesine neden olabilir?

Yıldız etkinliği: kısıtlamanın özgüllüğünün gevşetilmesi veya değiştirilmesi enzim aracılı DNA bölünmesi Yapabilmek için optimal olanlardan önemli ölçüde farklı olan reaksiyon koşulları altında meydana gelir. enzim . Yıldız etkinliği Mg varlığı nedeniyle olur2+, olarak NS örneğin HindIII'de görülür.

Önerilen: